外泌體研究又一利器 — IZON外泌體分離(lí)鑒(jiàn)定系統

2019/3/27


外泌體研究又一利器 — IZON外泌體分離(lí)鑒(jiàn)定系統

    近幾年外泌體研究火熱,文章數量一直居高不下 ,國内的外泌體研究起步較晚,但從趨勢來看,國内的外泌體研究正在逐漸加速發展。

越來越多的研究者将外泌體與轉化醫學聯系起來,特别是液體活檢方向,相信假以時日,外泌體必然爲疾病的診斷(duàn)與治療帶(dài)來重大改革。

廣州雲星科學儀器有限公司順應科研需求,代理瞭(le)IZON公司針對外泌體研究而開發的利器 — 外泌體分離鑒定系統,這将爲外泌體的研究帶(dài)來全新的視角。

 




TRPS—可控電阻式脈沖(chōng)傳(chuán)感技術


Tunable Resistive Pulse Sensing(TRPS )是目前可用於(yú)納米粒子表征的功能最強大的技術,也是納米粒子研究、發(fā)展和質控中重要的工具,該技術的應用在納米醫學和細胞外囊泡研究的領域中尤爲突出。IZON公司所開發(fā)的外泌體分離鑒定系統正是基於(yú)該原理。 

TRPS技術基於(yú)阻抗原理,與激光無關。當充滿電解液的納米孔上下兩邊(biān)施加一定的電壓時,納米孔内會産生離子電流。當顆粒通過納米孔會取代一定的電解液增加電阻,繼而産生電阻脈沖信号,該脈沖信号大小與顆粒的體積成正比。


TRPS 技術應用

鑒於(yú)分子尺寸已能得到測(cè)定且亞微尺寸受到人們較高的關注度,TRPS目前主要關注範圍是亞微米的樣品,檢測(cè)對象是尺寸範圍爲40 nm -10 μm的顆粒 。顆粒大小和濃度的檢測(cè)通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實現 。當顆粒流經納米孔,會産生一個電阻脈沖信号,通過該信号和校正顆粒的對比,來實現顆粒特征的逐個測(cè)定。


·     1. 顆粒大小和濃度的檢測(cè)通過使用已知尺寸和濃度的校正顆粒來實現。當顆粒流經納米孔,會産(chǎn)生一個電阻脈沖信号,通過該信号和校正顆粒的對比,來實現顆粒特征的逐個測(cè)定。

·     2. 顆粒流速與顆粒濃度成正比,所以可以準確(què)測定不同尺寸的顆粒濃度。於(yú)此同時,可以逐個測得每個顆粒的尺寸。TRPS的核心理念在於(yú)可以同時提供準確(què)的顆粒濃度和顆粒尺寸分布。

 


1 尺寸測定


TRPS中的離子電流電阻式脈沖單顆粒通過納米孔時的,可視離子電流“脈沖”單電流脈沖特寫展示特征脈沖形狀TRPS現可用於(yú)測定納米顆粒和不同來源的EVs的真實尺寸分布。請注意下圖中的縱軸代表不同尺寸範圍内顆粒的個數濃度,而不是比率。TRPS技術是目前唯一可以實現可靠顆粒測定的方法 。任何高可信度的顆粒研究項目或者跟顆粒相關的規定都需要數據具有高可靠性和易得性 。TRPS能夠提供高質量的測量數據(如尺寸分布及顆粒濃度)並(bìng)有望推動納米顆粒研究的快速發展。

 

 

2 濃度測定

 

TRPS技術能獲得非常準確(què)的濃度信息:顆粒速度與濃度成正比關系,與顆粒組成無關,因此,一定尺寸範圍内的顆粒濃度(Cmin-Cmax)可通過已知濃度的标準曲線計算得到。對於(yú)一張完整的數據圖,需要同時提供顆粒濃度和尺寸分布,然而許多應用中,提供更簡單的數據也同樣合适。TRPS利用簡單且可驗證的方法提供準確(què)、可靠的濃度。

 

 

3 尺寸電荷測定,包括Zeta電勢


TRPS技術通過分析單個顆粒在不同驅動力下電阻式脈沖的持續時間,跟已知尺寸、表面電荷和個數濃度的标準樣品比較,來逐個測(cè)定顆粒的表面電荷。每個脈沖的寬度與顆粒穿過錐形孔有關,通過分析脈沖寬度,可以獲得每個顆粒的速度。通過測(cè)定顆粒速度,可以獲得每個顆粒的電泳淌度,意味著(zhe)可以同時獲得顆粒的尺寸和電荷信息。跟大多數電荷測(cè)定技術一樣,電泳淌度可以簡單的轉換爲Zeta電勢。

 

上圖展示瞭(le)不同腦脊液樣品EVs的尺寸和帶電情況,表明TRPS技術提供的EVs詳細的電荷分析是一個十分實用的研究工具。來源於(yú)健康人樣品(綠點)的顆粒平均Zeta電勢爲-17 mV,而來自於(yú)疾病樣品(紫點)則爲-15 mV(顆粒均溶於(yú)PBS溶液)。(校正顆粒以橙色顯示)

 

外泌體分離鑒定系統

qNano

 

qNano 利用可控電阻式脈沖感應(TRPS)原理進行顆粒測定。功能強大且測量精準,取代瞭舊式激光測量方法。單一顆粒測量具有最高精度和可重複性,可用於測量:
? 尺寸及真實粒徑分布
? 特定尺寸範(fàn)圍内的顆(kē)粒濃度
? 基於(yú)逐個顆粒的顆粒表面電荷測(cè)定


  



主要應(yīng)用:

細(xì)胞外囊泡:外泌體(tǐ)|微粒|全血細(xì)胞|血小闆
納米醫學:脂質體|納米/微泡|高分子藥物輸送|能顆粒|免疫檢(jiǎn)測(cè)功能顆粒
病毒和疫苗特性描述:病毒|疫苗|細(xì)菌

 

qEV 細胞外囊泡(外泌體(tǐ))分離(lí)柱

 

多種規(guī)格分離柱可供選擇,實驗體積從(cóng)0.1ml到100ml,滿足不同實驗需求,最大程度降低實驗操作成本。



AFC自動(dòng)收集器


取代手工收集濾液,用於(yú)自動定量收集分離柱中流出的液滴,達到把不同活性組分裝到不同試管中去的目的。它将進一步提高EV隔離的可重複性,並(bìng)爲您節省手動觀察份數所需的時間。

很多研究人員懷疑自己養的細胞能不能做外泌體研究,其實不用擔心,外泌體已知是細胞之間傳(chuán)遞信息的信使,細胞沒有獨立存在的,任何表型的改變(biàn)(腫瘤侵襲,幹細胞修複,組織再生,胚胎發育等)都是經過細胞傳(chuán)遞,外泌體介導的。相信這套外泌體分離鑒定系統能夠給您的研究帶來意想不到的結果!

 



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